Главная страница
qrcode

Фибробласты. Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Уральский государственный медицинский университет Министерство здравоохранения Российской Федерации (фгбоу во угму минздрава России)


НазваниеФедеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Уральский государственный медицинский университет Министерство здравоохранения Российской Федерации (фгбоу во угму минздрава России)
Дата12.01.2020
Размер85 Kb.
Формат файлаdoc
Имя файлаФибробласты.doc
ТипРеферат
#67454
Каталог

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего образования
«Уральский государственный медицинский университет»
Министерство здравоохранения Российской Федерации
(ФГБОУ ВО УГМУ Минздрава России)





«Кожа. Фибробласты. Выведение и культивирование фибробластов Применение фибробластов в косметологии»
Студентка группы ОЛД-215


Содержание

ВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………..............3

ГЛАВА 1. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ О ФИБРОБЛАСТАХ.

ВЫВЕДЕНИЕ И КУЛЬТИВИРОВАНИЕ IN VITRO.

1.1. Роль фибробластов в регенерации тканей……………..….…..…4

1.2.

ГЛАВА 2. ПРАКТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ ФИБРОБЛАСТОВ

2.1. Применение дермальных фибробластов в косметолоии…….....8

ЗАКЛЮЧЕНИЕ……………………………………………………………….10

Список литературы…………………………………………………………...11

ВВЕДЕНИЕ

Кожа - прочный эластичный орган, выполняющий множество функций. Иногда кожу рассматривают как орган тела. На состояние кожи влияют условия труда, быта, климатические воздействия и процессы, происходящие в организме человека. Кожа тесно связана с жизнедеятельностью всего организма. Несмотря на прочность и устойчивость кожи к различным воздействиям, она подвержена к изменениям, которые могут произойти из-за множества причин. Дефекты кожи могут быть представлены: фибромой, липомой, рубцом и т.д.

Лечение дефектов кожи с использованием дермальных фибробластов - культивированных клеток мезенхимного рада, получило довольную известность и широкое использование во всем мире. Безопасность и эффективность данного метода обеспечивается регуляцией клеточных взаимодействий и поддержание гомеостаза кожи, в которых, непосредственно, могут участвовать дермальные фибробласты.

Данный тип клеток отвечает за координацию функций других клеток (эпителиальных, эндотелиальных, клеток волосяных фолликулов), в соответствии с расположением на теле. Также фибробласты создают оптимальные условия для их функционирования и пролиферации

Таким образом, цель доклада: рассмотреть способы применения дермальных фибробластов в лечении различных дефектов кожи.

Задачи:

1. Рассмотреть механизм регенерации кожи в целом.

2. Провести анализ влияния фибробластов на различные дефекты кожи.

Роль фибробластов в регенерации тканей
Фибробласты – одни из основных секреторных клеток организма, участвующие в формировании внеклеточного матрикса, репарации повреждений кожи, стимуляции роста кератиноцитов и сосудов. Они входят в дифферон, развивающийся из стволовых клеток мезенхимного происхождения. В соответствии со своим расположением в тканях и выполняемыми функциями фибробласты способны продуцировать проколлаген, фибронектин, гликозаминогликаны, проэластин, нидо-ген, ламинин, хондроитин-4-сульфат, тенасцин. Коллаген и эластин формируют волокнистый каркас тканей, гликозаминогликаны и фибронектин составляют аморфный (основной) компонент межклеточного матрикса, фибронектин отвечает за адгезию, подвижность, дифференцировку и взаимную ориентацию клеток. [1,5]

Роль фибробластов очень значительна, они участвуют в формировании базальной мембраны кожи посредством синтеза коллагена IV и VII типов, ламинина-1, нидогена и цитокинов, стимулирующих кератиноциты к синтезу компонентов базальной мембраны. Данные клетки также продуцируют и выделяют в межклеточное пространство сигнальные молекулы - цитокины и факторы роста, оказывающие аутокринный и паракринный эффекты. [4]

Аутокринный эффект обеспечивается секрецией ряда ростовых факторов, в частности, фактором роста соединительной ткани. Паракринный эффект обеспечивается секрецией фактора роста кератиноцитов, эпидермального фактора роста, фактора роста колоний гранулоцитов-макрофагов, интерлейкина, фактора роста фибробластов. В свою очередь, кератиноциты синтезируют интерлейкин, который стимулирует фибробласты к синтезу фактору роста кератиноцитов, образуя, таким образом, стройную систему взаимно стимулирующих положительных обратных связей. В опытах по выращиванию кератиноцитов на коллагеновом геле, содержащем фибробласты, обнаружено, что фибробласты кожи не только стимулируют пролиферацию кератиноцитов, но и способствуют развитию слоев кожи – базального, шиповидного, зернистого и рогового. [1,4]

Фибробласты играют значительную роль в процессах эпителизации и заживления ран. Заживление ран включает в себя несколько стадий, среди которых можно выделить следующие:
Воспаление
  • Грануляция
  • Эпителизация (в случае неполной эпителизации, добавляют стадию образования рубца).
    В случае больших повреждений ткани наблюдается дифференцировка фибробластов в миофибробласты, которые характеризуются измененным синтезом фибронектина и гликозаминогликанов, повышенным синтезом коллагена I типа. Миофибробласты вызывают перерождение кератиноцитов , что способствует склерозу тканей и образованию рубцов. [3]


    Выделение и культивирование фибробластов in vitro
    Активные попытки использовать культивированные фибробласты в медицинской практике стали предприниматься после того, как было установлено, что дермаль-ные фибробласты в культуре сохраняют диплоидный кариотип, имеют ограниченную продолжительность жизни], не экспрессируют антигены главного комплекса гистосовместимости класса II, не проявляют онкоген-ных свойств. Фибробласты получают из биоптатов кожи посредством ферментативной обработки или механической дезагрегации образцов. В настоящее время наиболее часто используют ферментативный способ получения первичной культуры. Для этого биоптат промывают физиологическим раствором или фосфатно-солевым буфером, содержащим антибиотики, обрабатывают раствором фермента коллагеназы и/или трипсина. Затем, осторожно пипетируя, клетки освобождают от матрикса, осаждают центрифугированием, отмывают от ферментов и после ресуспендирования в культуральной среде, культивируют в условиях насыщающей влажности в С02-инкубаторе.

    Получаемая клеточная популяция — гетерогенна, так как выделенные фибробласты находятся на разных стадиях развития (небольшие веретеновидные активно делящиеся клетки-предшественники; более крупные веретеновидные созревающие клетки; крупные плащевидные зрелые фиброциты). Кроме того, различают фибробласты сосочкового, сетчатого слоев дермы и фибробласты, ассоциированные с волосяным фолликулом. Каждый тип фибробластов имеет свои особенности: фибробласты сосочкового слоя, по сравнению с фибробластами сетчатого, делятся с большей скоростью, их рост не полностью ингибируется контактным торможением. Фибробласты сетчатого слоя быстрее растут на подложке из коллагена I типа. Фибробласты сосочкового слоя синтезируют протеогликан декорин, в то время как для сетчатых фибробластов характерен синтез версикана. По синтезу коллагена I и III типов дермальные фибробласты значительных различий не имеют. [5]

    Иммунофенотипический профиль культивируемых фибробластов кожи в норме соответствует профилю клеток мезенхимного ряда. Фибробласты имеют высокий уровень экспрессии виментина, молекул адгезии (CD44, CD49b, CD54, CD90, CD105), не экспрессируют маркеры прогениторных, гемопоэтических (CD34, CD45, CD133, CD117, HLA-DR, нестин) и эндотелиальных (фактор фон Виллебранда, CD106) клеток. [4,5]

    На скорость роста и свойства фибробластов в культуре оказывают влияние следующие факторы: количество пассажей, способ культивирования, тип используемых сред и сывороток, возраст донора, область проведения биопсии. Показано, что для культур, полученных от пожилых доноров, скорость удвоения клеточной популяции снижена, наблюдается более быстрое старение клеточных культур, количество клеток в них на момент образования монослоя на 50% меньше, чем у молодых. Это связано с тем, что в клеточных культурах, полученных от пожилых доноров, преобладают более крупные зрелые дифференцированные фибробласты.

    Для определения пролиферативного потенциала клеточной культуры используют понятие эффективности клонирования, которая представляет долю клеток, способных образовывать колонии из 16 и более клеток в течение 18 суток. Эффективность клонирования в значительной степени зависит от таких факторов, как условия культивирования, количество пассажей, тип используемой сыворотки и, при одинаковых условиях, она является очень точной и воспроизводимой характеристикой штамма клеток. Эффективность клонирования тканеспецифична и, по всей видимости, имеет генетическую предопределенность, так как является постоянной для данного организма и имеет незначительную корреляцию с возрастом донора. Для дермальных фибробластов эффективность клонирования в процессе культивирования плавно нарастает, достигая максимума на 5 пассаже, затем образуется плато и последующий спад. Такие изменения связаны с кинетикой роста фибробластов: к пятому пассажу постепенно увеличивается доля активно делящихся клеток в силу их селективного преимущества, затем наблюдается постепенное истощение их пролиферативного потенциала. Для фетальных штаммов фибробластов эффективность клонирования находится в пределах 38^82%, для постнатальных штаммов — 12^60% [1,4,5].

    Считается, что из аллогенных фибробластов наибольшей клинической эффективностью обладают эмбриональные (фетальные) фибробласты, которые имеют больший пролиферативный потенциал по сравнению с клетками постнатальных культур. Однако их применение имеет ряд ограничений, в том числе этического характера. В то же время показано, что фибробласты от пожилых доноров сохраняют свой терапевтический потенциал, не теряют способность делиться и продуцировать коллаген I типа, несмотря на уменьшение их числа и эффективности клонирования в стареющем организме. [3]

    2.1. Применение фибробластов в косметологии




  • Таким образом, применение культивированных аутологичных фибробластов, как живой динамичной клеточной системы позволяет эффективно корректировать возрастные изменения кожи и рубцы пост-акне, получая длительный клинический эффект.

    Имеющиеся на сегодняшний день данные позволяют предположить, что наиболее перспективным направлением развития технологий коррекции косметических дефектов является совместное использование аутологичных дермальных фибробластов с компонентами межклеточного матрикса. [5]


    Заключение

    Таким образом, применение дермальных фибробластов является перспективным методом для лечения дефектов кожи. Данные клетки легко культивируются в лабораторных условиях, не теряя своих функций. Благодаря ключевой роли в поддержании гомеостаза ткани, фибробласты, как никакие другие клетки, способны эффективно создавать условия для пролиферации и миграции других типов клеток. Полученные на сегодняшний день данные достоверно демонстрируют высокую клиническую эффективность и безопасность применения фибробластов для коррекции косметических дефектов и лечения длительно незаживающих ран и ожогов.

    В связи с успехами в области клеточных технологий и началом их применения в клинической практике получило активное развитие новое направление в медицине – клеточная терапия. Среди наиболее перспективных и успешных областей использования культивированных клеток можно особо выделить лечение повреждений кожи посредством дермальных фибробластов, которые, благодаря своей эффективности и относительно небольшой себестоимости, прочно заняли определенную нишу.

    Список литературы.

    1. .Кузнецов С.Л.: Гистология, цитология и эмбриология: Учебник / С.Л. Кузнецов, Н.Н. Мушкамбаров. – 2-е изд., испр. и доп. – М.: ООО «Медицинское информационное агенство», 2014. – 640с.

    2. Адаскевич В.П., Козин В.М.: Кожные и венерические болезни» - учебное пособие. – М.: Мед. лит., 2018. – 672 с


    4. Зорина А.И., Бозо И.Я., Зорин В.Л., Черкасов В.Р., Деев Р.В. Зорина А.И., Черкасов В.Р., Копнин Б.Л., Деев Р.В., Неробеев А.И., Аликова А.В., Шеин А.В., Донецкая С.В.: «



    перейти в каталог файлов


  • связь с админом